Yaygın damar içi pıhtılaşması olan çocuk hastalarda trombositopeni gelişiminde trombosit aktivasyonu ve apopitozisin rolü

Abstract

YDİP olan çocuk hastalarda trombositoperünin gelişiminde aktivasyon ve apopitozisin rolünün belirlenmesi. Gereç ve Yöntem: Çalışma, YDİP puanlamasından 4 ve üzerinde puan alan, yaşlan 2 ay ile 13 yaş arasında değişen hastalardan alman plazma örnekleri ile yapıldı. Topken 8 sağlıklı vericinin trombositleri in vitro olarak kullanıldı. YDİP'li hastaların plazması eklenen ve eklenmeyen trombosit örnekleri 5 gün süre ile inkübe edildi. Çalışmada kullanılan floresan boyalarla (CD41, JC-1, CD62P, Annexin V, Anti-Caspase-3) boyandıktan sonra akım sitometride analiz edildi. Sonuçlan 1-YDÎP'li hastaların plazmaları eklenen ve eklenmeyen tromboşitlerin beş günlük inkübasyonu sonrasında ölçülen JC1 pozitif hücre oram istatiksel olarak anlamlı farklı saptandı, her iki grubun kaspaz 3 pozitif hücre oranlan arasında ise fark olmadığı görüldü. 2-Parsiyel tromboplastin zamanı (PTT) uzamış olan YDİP'li hastaların plazması eklenmiş olanlarla, PTT değeri nonnal YDİP'li hastaların plazması eklenmiş olanlar arasında, aktivasyon göstergelerinden annexin V pozitif hücre oranının anlamlı derecede farklı olduğu saptandı 62 3-Mortalite ile sonuçlanan grupta apopitozis göstergelerinden JC1 pozitif hücre oranının anlamlı derecede yüksek olduğu saptandı Tartışma' YDİP'li hastaların plazması eklenenlerde, eklenmeyenlere göre, apopitozis göstergelerindenden JC1 pozitif hücre oranında artış olması, YDÎP sürecinde trombosit apopitozisinin olabileceğini düşündürmektedir. AnnexinV pozitif hücre oranının yüksek saptanması ile apopitozis göstergeleri olan JC1 ve kaspaz 3 pozitif hücre oranının yüksekliği birliktelik göstermediğinden, kaspazdan bağımsız apopitozisin gerçekleşmiş olabileceği veya aktivasyon lehine yorumlanabilir. Hastalardan, mortalite ile seyreden grupta apopitotik göstergelerden JC1 pozitif hücre oram sağ kalanlara göre anlamlı derecede yüksek saptanması, kliniği daha ağır olan YDİP'li hastaların trombosit mitokondri membran potansiyelindeki değişikliğin daha belirgin olduğu, dolayısıyla, apopitotik aktivitenin daha belirgin olduğu şeklinde yorumlanabilir. PTT değeri yüksek olan YDİP'li hastaların plazması eklenmiş olanlarda, annexinV pozitifliği olan hücrelerin oram yüksek saptanmış olup, bu durum, sadece PTT değeri yüksek olan hastaların plazmalarında bulunan bir faktörün trombosit aktivasyonuna yol açtığını düşündürebilir. Sonuç olarak, YDÎP sürecinde trombositopeni gelişiminde, apopitozis ve apopitozis dışı mekanizmaların birlikte rol oynadığı düşünülebilir. YDİP'li hasta plazması eklenenlerde yapılan trombosit inkübasyonunda teorik olarak beklenen aktivasyon görülmemesi in vitro ortamdan kaynaklanmış olabilir.